Идентификација маркера херпесне инфекције код трудница

Херпес инфекција може бити плодно тло за неплодност, јер вируси имају негативан утицај на репродуктивно здравље жена и мушкараца. Чак и на почетку трудноће, херпес вируси изазивају озбиљан ризик од интраутерине инфекције фетуса и неповољног исхода трудноће [1, 4, 5, 7]. Херпес симплек вирус (ХСВ) је често узрок неуролошких, соматских и ендокриних проблема код новорођенчади и старије дјеце [3]. Генитална локализација херпеса је посебно опасна, што се јавља код трудница у 7-35% случајева [2, 6].

Сврха овог рада била је да се проучи оптимизација дијагнозе херпесне инфекције код трудница са оптерећеном акушерском и гинеколошком историјом (ААА) у динамици трудноће..

Прегледано је 74 труднице: 49 примипарних и 25 вишекратних. Старост пацијената је од 20 до 41 године. Све жене су имале ОАГА и послате су им МОНИИАХ са дијагнозом "хроничне херпес вирусне инфекције"; Студија је спроведена у динамици, почевши од 16-24 недеље. трудноће.

За идентификацију маркера ХСВ, коришћени су виролошки (метода брзе културе - БЦМ), молекуларно биолошки (ПЦР, реал-тиме ПЦР) и серолошки (ЕЛИСА) методе. Крв, урин и урогенитални сцрапингс су проучавани као клинички материјал од трудница. О вирусном оптерећењу у различитим клиничким материјалима процијењена је количина ХСВ ДНК, која је одређена ПЦР-рт. За сваки узорак је забележена вредност Цт прага циклуса (праг циклуса је тачка у којој је флуоресценција већа од позадинске вредности) и израчунате су медијане. Добијене вредности прага циклуса (Цт) су упоређене са вредностима стандардних контролних узорака са познатим садржајем ДНК у узорку. Да би се процијенили параметри хуморалног одговора, тестирана је серумска ТИФА на присуство специфичних антитела на ХСВ (АТ) ИгМ и ИгГ класе. Активност антитела је такође одређена, која је изражена у титрима, и авидност ИгГ-АТ, која је оцењена индексом авидности (АИ)..

Међу испитаним трудницама било је високе стопе инфекције: 43 (58%) од 74 жене имало је једну или другу урогениталну инфекцију (ИГО) вирусне и / или бактеријске етиологије. Метод дијагностике ИГО - спровођење ПЦР-а са квалитативном проценом резултата. Детаљан преглед историје показао је да је у 21 (28%) трудница откривена мешовита ИГО. Структура инфекције обухватала је читав низ патогена УГО: Уреапласма уреалитицум, Мицопласма хоминис, Токопласма гондии, Гарднерелла вагиналис, Цхламидиа трахоматис, Цандида албицанс, Хуман папилломавирус. Код 22 (30%) трудница пронађена је једина узрочница ИГО: Уреапласма уреалитицум - у 15 (20,4%), Мицопласма хоминис - у 4 (5,4%). У овом случају, пацијент се није жалио, није било клиничких знакова инфекције. Гарднерелла вагиналис је нађена код 3 (4,2%) трудница..

У првој фази прегледа болесника извршена је компаративна анализа учесталости детекције директних маркера ХСВ (инфективна активност вируса и ХСВ ДНК). Ниједна од ових жена није имала никакве клиничке манифестације гениталног херпеса током прегледа. Пацијент је сматран инфицираним ако је вирусни маркер детектован у најмање једном од испитиваног клиничког материјала. Током читавог периода испитивања, 18 (24,3%) трудница имало је ХСВ маркере. Истовремено, ХСВ ДНК је детектована код 15 (20,3%) трудница, инфективног вируса - код 3 (4%) жена (Слика 1). Разлике у учесталости детекције ХСВ ДНК у поређењу са инфективним активним вирусом биле су статистички значајне (п<0,05).

Утврђена је учесталост детекције ХСВ у различитим клиничким материјалима. Испитано је 525 биолошких материјала од трудница на присуство директних маркера ХСВ: 175 узорака крви, узорака урина и урогениталних сцрапинга. У анализи свих испитиваних узорака у целини, сви коришћени методи (БКМ, ПЦР и ПЦР-рт) најчешће су били маркери ХСВ у урогениталним струганима (27/175, 15,4%) и узорцима урина (20/175, 11,4%) значајно мање - у крви (4/175, 2,3%, стр<0,05).

Упоредо са укупном оцјеном, извршена је компаративна анализа учесталости детекције ХСВ маркера у зависности од методе. ХСВ ДНК је детектована помоћу ПЦР у 16/525 (3%) узорака, а ПЦР-рт у 30/525 (5,7%) узорака. Статистичка анализа је показала да ПЦР-рт метода детектује вирусну ДНК значајно чешће од класичне ПЦР методе (стр<0,05). Инфекционно-активный вирус в биологических материалах (БКМ) обнаруживался значительно реже, чем ДНК ВПГ - в 5/525 (1%) пробах. Таким образом, чувствительность обнаружения ВПГ методом ПЦР-rt превышала чувствительность двух других использованных методов.

Мала инциденција ХСВ у клиничким узорцима може се објаснити или одсуством инфективног активног вируса у овим узорцима у присуству вирусне ДНК, или нижом осетљивошћу ЦТБ методе у односу на ПЦР..

Истраживања су показала да је количина ДНК пронађена у мокраћи и урогениталном стругању већа од количине ДНК у узорцима крви. Када је статистичка обрада вредности прага циклуса (Цт) разлике статистички значајне (п<0,05).

Испитивање серума крви показало је да је 64/74 (86,5%) трудница имало анти-ХСВ-ИгГ антитела током почетног прегледа. Анти-ХСВ-ИгГ антитела су била одсутна код 10 (13,5%) жена. Код 2 (2,7%) трудница, током почетног прегледа, поред ИгГ-АТ, откривена су антитела класе ИгМ, која су маркери акутне фазе инфекције..

Приликом процене авидитета ИгГ-АТ, утврђено је да је код свих 64 (86,5%) жена које су имале ИгГ-АТ до ХСВ, антитела карактерисана високом авидношћу (ИА> 50)..

Труднице су испитиване у динамици у три фазе трудноће: у другом и трећем триместру и прије порођаја. Током почетног испитивања у другом триместру трудноће, маркери ХСВ и / или ПЦР су детектовани од стране 12 (14,8%) жена са ХСВ маркерима и / или ПЦР. Код 8 (12,2%) трудница детекција ХСВ маркера је комбинована са детекцијом високо присутног ИгГ-АТ (ИА> 50) са високим титром (1: 320). Од испитиваних трудница, ИгГ-АТ није детектован у два случаја, што указује на примарну инфекцију..

Промена концентрације ИгГ-АТ или детекција АТ са високим титром у крвним серумима студије у динамици праћена је идентификацијом директних маркера ХСВ током читавог прегледа код 3 труднице. Један трудни ИгГ-АТ никада није детектован, упркос идентификацији ХСВ маркера током студије..

Код 2 (3%) жена, директни маркери ХСВ су детектовани током почетног прегледа у комбинацији са ИгМ-АТ. Код једне од ових жена, трудноћа је завршила у спонтаном побачају у другом тромесечју..

У трећем триместру трудноће први пут су ХСВ маркери детектовани код 3 од 74 труднице. Серолошки преглед је показао да једна жена није имала антитела на ХСВ. Након даљњег прегледа ове труднице, појава ниско-авидне (ИА<50) IgG-АТ с низкими титрами 1:20. Это указывало на первичное инфицирование. У 2-х пациенток произошла реактивация инфекции, при этом у одной были выявлены высокоавидные IgG-АТ с высокими титрами 1:320, у другой титр антител составил 1:20.

Последње истраживање жена пре порођаја показало је да су ХСВ маркери први пут откривени код 3 труднице, упркос присуству антитела на ХСВ, што указује да је херпес инфекција реактивирана.

У 4 (5,4%) трудних ХСВ маркера је откривено током прегледа. Приликом анализе вирусног оптерећења у клиничким узорцима, утврђено је да се у 2 труднице повећава вирусно оптерећење током времена са повећањем гестацијског периода: са 100 копдНа / мл током почетног прегледа на 10,000 копДНА / мл у последњем испитном периоду. Две друге промене вирусног оптерећења нису забележене..

Тако, према добијеним резултатима, почевши од другог тромесечја гестације, 15 (20,3%) од 74 труднице је реаговало са херпес вирусном инфекцијом. Примарна инфекција дијагностикована је код 3 (4,0%) трудница, а 2 (2,7%) у другом триместру трудноће и 1 (1,3%) у трећем. 49 (66,2%) трудница имало је асимптоматску колону. Код 7 (9,5%) жена које су помињале МОНИИАГ дијагностиковану хроничну ХСВ инфекцију, ХСВ инфекција је била одсутна током трудноће (Слика 2).

Серолошко испитивање 74 труднице у динамици показало је да реактивација херпетичке инфекције није увек праћена идентификацијом високих ИгГ-АТ титара или повећањем титара у динамици. Тако, код 3 од 15 (40%) жена, при реактивацији ХСВ, ИгГ-АТ титри су детектовани са ниским вредностима (од 1:20 до 1:80)..

Закључци

Учесталост детекције маркера херпесне инфекције код трудница зависи од коришћених дијагностичких метода (виролошки, молекуларно-биолошки, серолошки) и дијагностичких медија (крви, урина, урогениталних остатака). Молекуларно-биолошке методе (ПЦР, ПЦР-рт) имају највећу дијагностичку вриједност у проучавању материјала из таквих медија као што су мокраће и урогениталне остатке..

Поновна активација херпесне инфекције није увек праћена идентификацијом високих ИгГ-АТ титара или повећањем титара током времена. Ово указује на ниску способност имуног система труднице да развије довољну количину антитела чак иу присуству директних маркера ХСВ-а и доказује потребу за имуно-корективним мерама код трудница са високим инфективним ризиком..

Према материјалима ввв.рмј.ру/

Литературе

  1. Макатсарииа А.Д., Битсадзе В.О., Акинсхина С.В. Синдром системског инфламаторног одговора у акушерству. М: Мед. информ агенција. 2006. п.
  2. Никонов А.П., Астсатурова О.Р. Генитални херпес и трудноћа // Гинекологија. 2002. - том 4. - № 1. - П. 4-6.
  3. Полетаев А.В., Будикина Т.С., Морозов С.Г. и други: Инфекција мајке као узрока патологије фетуса и новорођенчета // Алергологија и имунологија. 2001. В. 2. № 2. П. 110-116.
  4. Зинзерлинг А.В., Мелникова В.Ф. Перинатална инфекција: практични водич // Практично. хандс-он. Петерсбург: Епби Ст. Петерсбург, 2002. п.
  5. Анзивино Е., Фиорити Д., Мисцхителли М. ет ал. Статус епидемиологије, епидемиологије, дијагностике, превенције и превенције // Вирол. Ј. 2009. Вол. 40. П. 1-11.
  6. Бурсреин Д.Н. Секуалли преноси смернице за третман // Цуррент Опин. Педиатрицс. 2003. - Вол. 15. - П. 391-397.
  7. Сулигои Б., Цусан М., Сантопадре П. ет ал. Специфична серопреваленција ХСВ-2 међу различитим популацијама у Риму, Италија. Тхе Италиан Херпес Манагемент Форум // Сек Трансм. Инфецт. 2000. Вол. 76. - П. 213-214.