Генитална херпес инфекција (ХСВ, ХСВ) је распрострањена широм света, а епидемиолошке студије показују повећање стопе инфекције свуда. Генитални херпес је један од узрока улцерозних лезија гениталија. Херпес инфекција је изазвана типовима ХСВ 1 или ХСВ-2, а већина случајева гениталног херпеса је повезана са ХСВ-2, али се узима у обзир и инфекција и ХСВ-1. а тежина релапса је мања код ХСВ-1 него са ХСВ-2. Поред тога, тежина прве епизоде и реактивација са инфекцијом ХСВ-2 је нижа код пацијената са претходним ХСВ-1. Треба напоменути да је већина херпес инфекција асимптоматска или недијагностикована. Херпетичка инфекција може изгледати атипично, што отежава постављање дијагнозе. Већина случајева преноса вируса на партнера или мајку на новорођенче јавља се у одсуству клиничких симптома. Проведена су истраживања која су показала да ХСВ повећава ризик од ХИВ инфекције. Антивирусна терапија смањује клиничке манифестације ХСВ, што значајно смањује ризик од трансмисије.
Важно јеДијагностицирање херпеса је важно за одређивање тактике управљања, али херпес тестови нису укључени у скрининг студије..
Постоји много начина да се открије ХСВ, а клиничку дијагнозу гениталног херпеса треба увек подржавати лабораторијским тестовима, укључујући серотипизацију, пошто серотип утиче и на прогнозу и на режим лечења.. Коначна дијагноза гениталног херпеса утврђује се на основу визуелизације специфичних знакова у гениталном подручју, уз ослобађање вируса, или уз детекцију антигена.. У неким лабораторијама, детекција ХСВ ДНК помоћу молекуларних дијагностичких метода замењује изолацију вирусне културе и ЕЛИСА дијагностику. Серолошки тестови се изводе код пацијената са симптомима херпесне инфекције, када директне методе показују негативне резултате, у одсуству симптома и за утврђивање прошле или садашње инфекције..
На резултате лабораторијске дијагнозе ХСВ утичу следећи аспекти:
- тип теста;
- квалитет узорка,
- лабораторијске способности;
- интерпретација резултата.
Директне методе
Узорци добијени од везикуларних лезија у првих 72 сата њиховог појављивања имају велику дијагностичку вредност. Други биоматеријали из ране лезије или студије гениталног размаза се изводе ако постоји висок ризик од ХСВ. Ако се корице појаве на позадини исцељења, вјероватноћа детекције ХСВ је значајно смањена. Употреба агресивних средстава за дезинфекцију лезија може инактивирати вирус. Третман калцијевим алгинатом је штетан за ХСВ и стога није примјенљив..
Директни тестови потврђују присуство ХСВ-а у сумњивом фокусу или у секрету из гениталија. У идеалном случају, анализиран је узорак из везикуле који се појавио пре мање од 24 сата..
Ако има много мехурића, усисајте садржај неколико. Према студијама, осетљивост анализе је нижа код пацијената са рекурентним лезијама него код пацијената са првим епизодама.
У неким случајевима, електронска микроскопија течног биоматеријала може дати позитиван резултат. Ова процедура, иако брза, је релативно неосјетљива, а позитивни резултати се јављају само код вањских лезија (осип на стражњици или бедрима, рјеђе на слузницама). Пожељно је узети течност за анализу из целе везикуле помоћу туберкулинског шприца, док је аспирација садржаја довољна..
Капљица је осушена на ваздуху и испитана микроскопом..
Неке лабораторије користе молекуларне методе за детекцију и типизацију ХСВ. Узорци узети за изолацију или детекцију антигена су такође погодни за методе детекције ДНК. Повећана осетљивост ПЦР дијагностике заснована на амплификацији нуклеинских киселина, у поређењу са другим директним методама (детекција културе или антигена), омогућава анализу материјала са минималним бројем патогених честица.
Стандардна вирусна култура
Сетва на хранљивој подлози је златни стандард за детекцију ХСВ, специфичност је 100% за ХСВ-1 и ХСВ-2, осетљивост зависи од стадијума херпесне инфекције и времена пријема узорка..
Осетљивост се креће од 75% за прве епизоде до 50% за релапсе..
РИФ у херпесу
Детекција ХСВ антигена бојањем са ДФА размазом (флуоресценција) може обезбедити брзо одређивање ћелијске културе. Важно је да се за ову анализу добије висококвалитетан узорак; у овом режиму, осетљивост теста може да достигне 90%, нарочито током почетне инфекције.
Материјал се боји специјалном флуоресцентном супстанцом, након чега следи микроскопија.
Детекција виралног антигена је алтернатива дијагностичкој методи културе, метода која може помоћи када, ако се неправилно обради и пренесе узорак, сваки присутни вирус може бити инактивиран.
За потврду ХСВ-а, осетљивост теста је слична или већа него код култура..
Детекција ХСВ антигена је могућа коришћењем ДФА тестова или имунопероксидазних тестова на фиксним и третираним ћелијским узорцима..
Дзанк смеар
Херпетичка инфекција узрокује типичне цитопатске промјене у гениталним епителним ћелијама). Они се повећавају у величини, појављују се интрануклеарне инклузије и често се визуализују мултинуклеарне ћелије. Након специјалног бојења, узорци се прегледају помоћу светлосног микроскопа..
Недостаци: ова метода има ниску осетљивост и не разликује ХСВ-1 и ХСВ-2. Поред тога, слична слика може бити, на пример, код варичела.
Потребни су осјетљивији тестови како би се потврдила дијагноза..
Електронска микроскопија
Директна студија везикуларне течности или другог клиничког материјала помоћу електронске микроскопије за дијагнозу ХСВ је ограничена чињеницом да морфологија вируса такође не дозвољава да се разликује ХСВ од других херпес вируса (на пример, вирус варичела-зостер). Овај традиционални метод је у великој мери замењен бојањем флуоресцентним размазом, што је обезбедило специфичан тип диференцијације за ХСВ-1 и ХСВ-2.
Детекција ДНА вируса
Вирусна ДНК се може детектовати хибридизационим методама користећи радиоактивно обележене или биотиниловане узорке. Ове методе су у великој мери замењене осетљивијим и мање дуготрајним студијама које користе амплификацију циљне ХСВ ДНК коришћењем ланчане реакције полимеразе (ПЦР). Специфичност поступка амплификације обезбеђена је или спровођењем поновљене ПЦР дијагностике са циљним специфичним прајмерима, или коришћењем ХСВ-специфичне хибридизације са амплификованим производима..
У случају могућег гениталног херпеса, ПЦР детектује вирусну ДНК у року од неколико дана након што лезија не садржи доказни инфективни вирус. То значи да дијагностички метод заснован на амплификацији нуклеинске киселине може произвести позитиван резултат чак и када се симптоматски опоравак догоди и лијечење више није потребно..
Негативни резултати сејања обично се потврђују ПЦР дијагностиком. Осетљивост ПЦР је већа од стандардне културе. Појава ПЦР у реалном времену минимизирала је ризик од лажно позитивних резултата..
Индиректне серолошке анализе
Око 8-10 мл крви се сакупља у епрувети без антикоагуланта или конзерванса. Након коагулације на собној температури, серум се центрифугира и стави у другу епрувету. Ако је складиштење потребно неколико недеља, серум се хлади на 4 ° Ц или замрзава на температури испод -20 ° Ц. Не препоручује се замрзавање целе крви због хемолизе, што чини узорак непогодним за серолошко тестирање..
Анализа за откривање антитела на ХСВ се прописује када се друге виролошке студије не могу извести или дати негативне резултате). Ово посебно важи за асимптоматску инфекцију..
Серолошки тестови за ХСВ могу се применити у следећим случајевима:
- проучавање преноса херпес инфекције на партнера;
- прва епизода инфекције, посебно код трудница;
- рецуррент ХСВ;
- анкета неусклађених парова,
- планирање трудноће (мушкарац је позитиван, жена је негативна);
- Оптерећена акушерска и гинеколошка историја са сумњом на херпесну инфекцију;
- скрининг за СПИ;
- скрининг код пацијената инфицираних ХИВ-ом да открију ХСВ-2.
Иако многи серолошки тестови детектују антитела на ХСВ, није могуће установити одређени тип (1 или 2).
Постоји блиска серолошка веза између ХСВ-1 и ХСВ-2, од којих свака кодира серолошки различит гликопротеин Г (гГ-1 и гГ-2). Ова разлика се користи у развоју серолошких тестова специфичних за одређени тип..
ЕЛИСА, имуноблотинг
Имуноблотинг (ВБ) је стандард за детекцију антитела на ХСВ. Тестови имају високу осетљивост и способност разликовања антитела од ХСВ-1 и ХСВ-2. Реакција се дешава са ослобађањем фиксних протеинских матрица ("блота") из лизата ХСВ-1 или ХСВ-2 ћелија.
Највећа дијагностичка вредност је дефиниција ИгМ антитела која се појављују приближно 2 недеље након инфекције, или су присутна у крви током хроничне инфекције или њене активације..
ИгГ се одређује дуготрајним постојањем инфекције у телу или када се активира.
Важно јеЕЛИСА метода може бити квантитативна (одређивање титра антитела, виши, оштрији процес) и квалитативна (присуство вируса, типа, антитела, претходних релапса).
Детекција антитела на преданимне протеине вируса помаже да се процени трајање процеса.
Дешифрирање анализе ЕЛИСА за херпес:
- ИгМ "-", ИгГ до "+" протеина, ИгГ касно "+" / примарна акутна инфекција или рецидив.
- ИгМ "-", ИгГ до преурањених протеина "-", ИгГ касно "+" / имају имуни одговор на херпес вирус (носач).
- ИгМ "+", ИгГ до "+" протеина, касно ИгГ "-" / примарна акутна инфекција.
- ИгМ "+", ИгГ до "+" протеина, ИгГ касни "+" / примарна акутна инфекција.
- ИгМ "-", ИгГ до преурањених протеина "-", ИгГ касно "-" / норма, што указује на одсуство патолошког процеса.
Тестирање отпорности
Постоји велики број антивирусних лекова за лечење ХСВ инфекција; већина њих је прописана ацикловир. Отпорност ХСВ на ацикловир расте, а скоро сви клинички значајни сојеви резистентни на ацикловир дијагностицирају се код имунокомпромитованих пацијената, посебно оних који су заражени ХИВ-ом. Развој резистенције се обично јавља као резултат мутација у вирусном геному, а присуство селективног дејства лека доводи до стабилне популације вируса. Изолација ХСВ од перзистирајућих лезија, упркос адекватним дозама, сумњива је на отпорност на ацикловир.
Које болести се користе за диференцијалну дијагнозу херпеса?
Диференцијална дијагноза се изводи са следећим патологијама:
- Бецхтецхов синдром (неинфективни васкулитис, карактерисан орогениталним афтозним чиревима, оштећење коже и очију и захваћање ЦНС-а, гастроинтестиналног тракта и зглобова);
- кандидијаза;
- софт цханцре;
- Цоксацкие вирус;
- херпес зостер;
- сифилис;
- Кронова болест;
- неке дерматозе;
- ингвинални гранулом, итд..
Мисхина Вицториа, уролог, лекар